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自身免疫病的特征是機(jī)體免疫系統(tǒng)錯(cuò)誤地攻擊自身組織。檢測(cè)血清中的自身抗體是診斷、分型、評(píng)估疾病活動(dòng)度和預(yù)后的重要手段。ELISA因其高通量和定量能力，成為檢測(cè)自身抗體的優(yōu)先方法之一。·常見檢測(cè)靶點(diǎn)：o抗核抗體（ANA）：篩查系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）等結(jié)締組織病。ELISA可檢測(cè)針對(duì)特定核抗原（如dsDNA,Sm,RNP,SSA/Ro,SSB/La,Scl-70,Jo-1）的特異性抗體。o類風(fēng)濕因子（RF）：檢測(cè)針對(duì)自身IgGFc段的抗體，與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）相關(guān)（但也見于其他疾病和健康老人）。o抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（Anti-CCP）：對(duì)RA診斷特異性高。o抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）：如c-ANCA（抗PR3，韋格納肉芽腫）、p-ANCA（抗MPO，顯微鏡下多血管炎）。o抗磷脂抗體（aPL）：如抗心磷脂抗體（aCL）、抗β2糖蛋白I抗體（anti-β2GPI）、狼瘡抗凝物（LA），與抗磷脂綜合征（APS）相關(guān)。o***特異性抗體：如抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體（TPOAb）、抗甲狀腺球蛋白抗體（TgAb）（橋本甲狀腺炎）；抗谷氨酸脫羧酶抗體（GADAb）、抗胰島細(xì)胞抗體（ICA）（1型糖尿病）；抗組織谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶抗體（tTG-IgA）（乳糜瀉）。ELISA可用于COVID-19抗體的大規(guī)模篩查。北京國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒銷售價(jià)格

試劑平衡與樣本處理：試劑盒需從2-8℃冰箱取出后，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑溫度均勻。樣本需選擇適合ELISA檢測(cè)的形式（如血清、血漿），避免使用可能干擾檢測(cè)的樣本類型，或優(yōu)化稀釋液成分。孵育條件控制：嚴(yán)格按照說(shuō)明書條件孵育，建議全程振蕩孵育以增強(qiáng)反應(yīng)均勻性。若樣本濃度過(guò)高或存在基質(zhì)效應(yīng)，需通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定比較好稀釋倍數(shù)。儀器與操作規(guī)范：確認(rèn)酶標(biāo)儀濾光片設(shè)置正確（如TMB底物比色波長(zhǎng)為450nm），使用ELISA**高吸附力板子，避免細(xì)胞培養(yǎng)板等非**載體。天津小鼠ELISA試劑盒價(jià)格實(shí)惠心肌肌鈣蛋白ELISA試劑盒用于急性心梗診斷。

ELISA的結(jié)果可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮噭┖性O(shè)計(jì)進(jìn)行不同方式的判讀：·定量分析（Quantitative）：這是最常見的應(yīng)用。通過(guò)精確的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品中目標(biāo)物的***濃度（如ng/mL,pg/mL,IU/mL）。要求標(biāo)準(zhǔn)品濃度準(zhǔn)確，曲線擬合良好（R2>0.99），樣品OD值落在曲線范圍內(nèi)（比較好在中間線性好的部分）。適用于需要精確數(shù)值的研究和診斷。·半定量分析（Semi-quantitative）：當(dāng)無(wú)法獲得或不需要***濃度值時(shí)使用。通常將樣品的OD值與標(biāo)準(zhǔn)品（或一個(gè)已知的強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照）的OD值進(jìn)行比較，報(bào)告為“相當(dāng)于XXU/mL”或“高/中/低”。或者設(shè)定一個(gè)Cut-off值（臨界值），高于此值判為陽(yáng)性，低于判為陰性。常用于大批量篩查或監(jiān)測(cè)相對(duì)變化（如***前后抗體滴度變化）。·定性分析（Qualitative）：主要用于判斷樣品中目標(biāo)物是否存在（陽(yáng)性或陰性）。同樣需要設(shè)定一個(gè)Cut-off值。Cut-off值通常基于陰性對(duì)照的平均OD值加上2倍或3倍標(biāo)準(zhǔn)差（陰性均值+2SD/3SD），或基于ROC曲線分析確定。定性檢測(cè)在傳染病篩查（如HIV、HCV抗體）、妊娠檢測(cè)等中應(yīng)用***。無(wú)論哪種判讀方式，設(shè)置合理的對(duì)照（空白、陰性、陽(yáng)性、質(zhì)控）和嚴(yán)格遵守操作規(guī)程是結(jié)果可靠性的基石。

相較于傳統(tǒng)的儀器分析方法（如高效液相色譜法 HPLC、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法 GC-MS），ELISA 技術(shù)具有***的優(yōu)勢(shì)。首先，其前處理流程簡(jiǎn)單，大多數(shù)樣本*需均質(zhì)、提取、離心等基本操作即可上機(jī)檢測(cè)，省去了復(fù)雜的純化步驟，單個(gè)樣本的檢測(cè)時(shí)間可縮短至 1 小時(shí)內(nèi)，大幅提高了檢測(cè)效率。其次，ELISA 試劑盒的成本較低，無(wú)需依賴昂貴的儀器設(shè)備，*需酶標(biāo)儀即可完成檢測(cè)，特別適合基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)、市場(chǎng)監(jiān)管部門及企業(yè)自檢使用。此外，ELISA 技術(shù)可同時(shí)處理 96 孔板樣本，適用于大規(guī)模篩查，在突發(fā)食品安全事件中能夠快速鎖定問題批次，為監(jiān)管部門提供及時(shí)的數(shù)據(jù)支持。實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)包含試劑批號(hào)、操作時(shí)間和人員等信息。

ELISA也存在一些固有的局限性：1.*能檢測(cè)已知目標(biāo)物：依賴于特異性的抗體對(duì)，只能檢測(cè)預(yù)先設(shè)定好的目標(biāo)分子，無(wú)法進(jìn)行無(wú)假設(shè)的發(fā)現(xiàn)研究（如蛋白質(zhì)組學(xué)）。2.抗體依賴性：檢測(cè)性能（靈敏度、特異性、動(dòng)態(tài)范圍）高度依賴所用抗體的質(zhì)量。抗體的交叉反應(yīng)性、批次差異會(huì)直接影響結(jié)果。3.可能存在的干擾：o基質(zhì)效應(yīng)（MatrixEffect）：樣品中復(fù)雜的成分（如高脂、高蛋白、溶血、某些藥物、類風(fēng)濕因子、異嗜性抗體）可能干擾抗原抗體結(jié)合或酶活性，導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性。稀釋樣品有時(shí)能緩解，但會(huì)降低靈敏度。o鉤狀效應(yīng)（HookEffect）：在夾心法中，當(dāng)樣品中抗原濃度極高時(shí)，可能同時(shí)飽和捕獲抗體和檢測(cè)抗體，導(dǎo)致形成的“三明治”復(fù)合物減少，反而表現(xiàn)為信號(hào)下降（假陰性）。需對(duì)強(qiáng)陽(yáng)性樣品進(jìn)行稀釋復(fù)測(cè)。4.動(dòng)態(tài)范圍有限：標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍通常只有2-3個(gè)數(shù)量級(jí)，極高或極低濃度的樣品可能落在曲線范圍外，需要稀釋或濃縮處理。常見的ELISA類型包括直接法、間接法和夾心法。上海小鼠ELISA試劑盒價(jià)格實(shí)惠

某些病毒抗原檢測(cè)需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作。北京國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒銷售價(jià)格

ELISA試劑盒可檢測(cè)多種樣本類型，包括血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、尿液、唾液等。不同樣本需采用特定的預(yù)處理方法以確保檢測(cè)準(zhǔn)確性。例如，血清樣本應(yīng)避免溶血，離心后取上清；組織樣本需裂解并離心去除碎片；細(xì)胞培養(yǎng)上清可能含有高濃度蛋白，需適當(dāng)稀釋。某些樣本（如尿液）可能含有干擾物質(zhì)，需通過(guò)透析或添加抑制劑處理。此外，反復(fù)凍融可能破壞目標(biāo)蛋白，建議分裝保存于-80°C。樣本處理的標(biāo)準(zhǔn)化是保證ELISA結(jié)果可重復(fù)性的關(guān)鍵。北京國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒銷售價(jià)格