細(xì)胞增殖通俗點(diǎn)講，細(xì)胞增殖也就是細(xì)胞分裂，就像我們每個人的生命起點(diǎn)都是由一個受精卵不斷的分裂而來，然后形成由非常多的細(xì)胞組成的個體，當(dāng)然在增殖期間也不斷有衰老和死亡的細(xì)胞出現(xiàn)，這就是細(xì)胞增殖。增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖及遺傳的基礎(chǔ)。大家了解細(xì)胞增殖說明了什么嗎？細(xì)胞增殖的狀態(tài)是什么樣的？上海東寰給大家講解一下。細(xì)胞增殖簡單來說，只要有增殖就說明細(xì)胞還活著，所以細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征。科研小伙伴研究它干什么呢？舉幾個例子，比如某小伙伴發(fā)現(xiàn)了一種可能殺死腫的小分子，那如果要驗(yàn)證這個小分子是否有效，那就要研究加入這個小分子后的腫細(xì)胞增殖情況，又比如某個科研小伙伴突發(fā)奇想，把細(xì)胞的某...

血管生成實(shí)驗(yàn)血管生成實(shí)驗(yàn)（DH0011）一、服務(wù)介紹應(yīng)用Matrigel模擬機(jī)體環(huán)境，上面接種**細(xì)胞，觀察血管生成情況。二、服務(wù)內(nèi)容及價格服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價格服務(wù)周期（工作日）DH0011-1血管生成咨詢咨詢?nèi)⒖蛻籼峁?.客戶需提供生長狀態(tài)良好的細(xì)胞株及相關(guān)處理藥物2.實(shí)驗(yàn)前，客戶需告知具體的細(xì)胞處理方式及詳細(xì)要求。注：若有特殊處理的樣品，請盡可能出示相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）。四、服務(wù)流程1：細(xì)胞培養(yǎng)2：細(xì)胞轉(zhuǎn)染或藥物處理3：鋪Matrigel膠4：接種細(xì)胞5：觀察血管生成情況五、提交給客戶結(jié)果1、完整實(shí)驗(yàn)報告2、細(xì)胞培養(yǎng)圖片3、血管生成圖片六、服務(wù)項(xiàng)目說明1.實(shí)驗(yàn)周期...

ng）=×片段堿基對數(shù)（單片段）；適片段用量（ng）=×片段堿基對數(shù)（多片段）。注1：單片段重組反應(yīng)，若單個插入片段的長度大于載體，則應(yīng)將載體與插入片段的計算公式互換；注2：單片段重組反應(yīng)，若單個插入片段的長度小于200bp，則插入片段應(yīng)使用5倍的用量；注3：多片段重組反應(yīng)，各個插入片段的用量應(yīng)不少于10ng，使用上述公式計算適使用量低于此值時，直接使用10ng；注4：若按上述公式計算出的線性化載體用量低于50ng或高于200ng，建議按50ng或200ng用量使用；注5：線性化載體過長，插入片段過長或片段數(shù)過多，克隆陽性率均會降低。2、體系反應(yīng)；1、配制完成后，用移液器輕輕吸打混勻各...

這期上海東寰主要給大家講解一下幾種常見的流式檢測。歡迎大家的查閱！1、免疫細(xì)胞分型:隨著基因表達(dá)技術(shù)的誕生，新的單抗以及熒光素的獲得，同一樣本檢測多個marker（很常見的人外周血免疫細(xì)胞分型），或者多個參數(shù)確定目的細(xì)胞（如Treg細(xì)胞）通過多色流式得以實(shí)現(xiàn)。基于流式細(xì)胞術(shù)的多指標(biāo)高通量檢測特點(diǎn)，同樣也能實(shí)現(xiàn)對多種胞內(nèi)或胞外細(xì)胞因子的檢測，很大程度的節(jié)省樣本量，縮短人工操作時間，做到準(zhǔn)確定量分析。2、免疫功能檢測(胞內(nèi)細(xì)胞因子/胞外多因子檢測)：細(xì)胞因子作為細(xì)胞間信號傳導(dǎo)的分子，主要介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)，通過調(diào)節(jié)免疫促進(jìn)與免疫壓制的動態(tài)平衡，維持機(jī)體免疫系統(tǒng)的穩(wěn)定。檢測細(xì)胞因子...

3、培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度微生物生長需要一定的濕度條件。濕度對微生物生長的影響是通過影響微生物細(xì)胞內(nèi)水分活度進(jìn)而影響其新陳代謝來實(shí)現(xiàn)的。不同微生物的生長對濕度有一定的要求，一般來說，細(xì)菌為敏感，酵母和霉菌次之。降低濕度會使微生物的水分活度降低，從而減慢其生長速度。因此，在微生物培養(yǎng)的過程中，需要保持適宜的溫度和濕度，以有利于微生物的生長。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度的來源主要有培養(yǎng)基的水分散失、濕度自動調(diào)控系統(tǒng)以及培養(yǎng)箱所在的環(huán)境。因此，在使用培養(yǎng)箱的過程中，需要控制濕度，保持適宜的生長環(huán)境。4、培養(yǎng)物溢灑培養(yǎng)物溢灑是指含有生物危險物質(zhì)的液體或固體物質(zhì)意外與包裝材料分離的過程。一旦發(fā)生生物危害物品的溢出，尤其...

使每條染色體的著絲點(diǎn)排列在細(xì)胞中間的一個平面上。這個平面與紡錘體的中軸相垂直，類似于地球上赤道的位置，所以叫做赤道板。分裂中期的細(xì)胞，染色體的形態(tài)比較固定，數(shù)目比較清晰，便于觀察清楚。后期細(xì)胞分裂的后期，每一個著絲點(diǎn)分裂成兩個，原來連接在同一個著絲點(diǎn)上的兩條姐妹染色單體也隨著分離開來，成為兩條子染色體。紡錘絲牽引著子染色體分別向細(xì)胞的兩極，使細(xì)胞的兩極各有一套染色體。這兩套染色體的形態(tài)和數(shù)目是完全相同的，每一套染色體與分裂以前的親代細(xì)胞中的染色體的形態(tài)和數(shù)目是相同的。末期當(dāng)這兩套染色體別到達(dá)細(xì)胞的兩極以后，每條染色體的形態(tài)發(fā)生變化，又逐漸變成細(xì)長而盤曲的絲。同時，紡錘絲逐漸消失，出現(xiàn)新...

如發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)、組織愈合等。此外，外泌體與疾病的研究表明：外泌體可能在代謝性疾病的出現(xiàn)以及心血管健康中發(fā)揮作用。外泌體生物發(fā)生和神經(jīng)元細(xì)胞中分泌小泡的調(diào)節(jié)之間的交集為外泌體和神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制之間假定的聯(lián)系提供了新的見解。與研究外泌體在其他疾病中的作用相比，外泌體在中的研究進(jìn)展迅速，而且外泌體與的幾個主要特征有關(guān)。外泌體影響生長和轉(zhuǎn)移、綜合征和耐藥性。外泌體在進(jìn)展中的作用可能是動態(tài)的，并且與的類型、遺傳學(xué)和分期有關(guān)。外泌體的應(yīng)用外泌體用于免疫基于免疫細(xì)胞來源的外泌體能夠介導(dǎo)和調(diào)節(jié)機(jī)體對的免疫反應(yīng)，外泌體在免疫方面的潛力受到關(guān)注。其中樹枝狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體包含大量...

整體課題實(shí)驗(yàn)設(shè)計服務(wù)（DH0029）一、服務(wù)介紹東寰生物不*擁有經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，為您提供專業(yè)技術(shù)咨詢，根據(jù)您的“實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹薄ⅰ把芯糠较颉保Y(jié)合分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、蛋白免疫學(xué)，免疫學(xué)，微生物學(xué)為您量身設(shè)計切實(shí)可行的實(shí)驗(yàn)方案。而且東寰售后團(tuán)隊(duì)為您及時解決對實(shí)驗(yàn)設(shè)計、實(shí)驗(yàn)過程、結(jié)果分析的各種疑問，為您書寫SCI文章提供堅實(shí)的基礎(chǔ)。歡迎您來電咨詢。二、服務(wù)內(nèi)容1.科研課題整體設(shè)計2.預(yù)實(shí)驗(yàn)3.實(shí)驗(yàn)正式開展4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析處理5.提交客戶三、客戶提供1.客戶提供課題思路四、我們提供1.預(yù)實(shí)驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)和結(jié)果2.正式實(shí)驗(yàn)報告及相關(guān)數(shù)據(jù)3.數(shù)據(jù)分析及結(jié)果處理數(shù)據(jù)五、服務(wù)項(xiàng)目說明1.實(shí)驗(yàn)周期：具...

免疫熒光技術(shù)服務(wù)免疫熒光技術(shù)服務(wù)（DH0014）一、服務(wù)介紹免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記，標(biāo)記的抗原或標(biāo)記的抗體與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后，測定復(fù)合物中的熒光素，這種免疫技術(shù)稱為免疫熒光素技術(shù)。免疫熒光細(xì)胞化學(xué)分直接法、夾心法、間接法和補(bǔ)體法。二、服務(wù)內(nèi)容及價格服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價格服務(wù)周期（工作日）DH0014-01免疫熒光單標(biāo)記檢測咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標(biāo)記檢測咨詢咨詢?nèi)⒖蛻籼峁?、細(xì)胞株或細(xì)胞爬片。注：細(xì)胞爬片不宜太密；2、熒光檢測所用的抗體3、...

一、實(shí)驗(yàn)原理將Transwell小室放入配套培養(yǎng)板中，形成由細(xì)胞可穿透性膜分隔開的兩室系統(tǒng)，并將高營養(yǎng)液與低營養(yǎng)液分隔開，為進(jìn)行侵襲實(shí)驗(yàn)，在膜上室鋪基質(zhì)膠（用由細(xì)胞外基質(zhì)組成的凝膠堵塞膜中的孔，該凝膠旨在模擬細(xì)胞在體內(nèi)侵襲過程中遇到的典型基質(zhì)），通過將細(xì)胞放置在凝膠的一側(cè)，將趨化劑放置在凝膠的另一側(cè)，侵襲細(xì)胞將降解鄰近基質(zhì)并遷移通過ECM凝膠（基質(zhì)降解與定向運(yùn)動相結(jié)合，即侵襲），從而通過計數(shù)穿過細(xì)胞以檢測細(xì)胞侵襲能力。由于Matrigel膠內(nèi)含有層黏連蛋白、Ⅳ型膠原、纖連蛋白、硫酸肝素糖蛋白、觸角蛋白、TGF2β及生長因子等人體ECM的大多數(shù)成分，類似動物的基底膜。因此，可模擬真實(shí)的體...

細(xì)胞周期和凋亡技術(shù)服務(wù)（DH0003）一、服務(wù)介紹細(xì)胞周期（CellCycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時離開細(xì)胞周期，停止細(xì)胞分裂，執(zhí)行一定生物學(xué)功能（G0期）。細(xì)胞凋亡（Cellapoptosis）是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的**、表達(dá)以及調(diào)控等的作...

防止有Matrigel流經(jīng)上孔而留下殘留膠；3、需要按照細(xì)胞的生長速度定時采集圖像，并且對其成管長度、覆蓋面積、成環(huán)數(shù)和結(jié)點(diǎn)進(jìn)行測量和記錄，并且對其進(jìn)行統(tǒng)計分析；4、分上下孔的ibidi血管生成載玻片能去除凹液面，使成像效果更好。（Matrigel鋪在下孔，細(xì)胞鋪在Matrigel上，上孔充滿培養(yǎng)基）2、數(shù)據(jù)分析（在特定的時間點(diǎn)采集圖片，并且進(jìn)行圖像分析（Wimasis全自動分析）測量小管長度，成環(huán)數(shù)，細(xì)胞覆蓋面積和結(jié)點(diǎn)。之后在對測量結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析以說明實(shí)驗(yàn)結(jié)果。）三、實(shí)驗(yàn)具體步驟1、準(zhǔn)備基質(zhì)膠1）實(shí)驗(yàn)前一天將Matrigel置于冰盒中，放入4度冰箱，使膠能過夜緩慢融化。（注意：同樣...

也可以挑去單克隆細(xì)胞株進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)，以得到滿意的穩(wěn)定表達(dá)目的基因的細(xì)胞株。6)使用qRT-PCR和Westernblot的方法檢測目的基因的表達(dá)量和蛋白水平是否顯著提高。7)由此可得三組細(xì)胞株：a.正常細(xì)胞株；b.空載病毒載體的細(xì)胞株；c.過表達(dá)目的基因的病毒載體的細(xì)胞。8)在后續(xù)培養(yǎng)傳代該穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株時，培養(yǎng)基中需添加低濃度Puromycin做壓力篩選條件。注意事項(xiàng)1.為避免慢病毒后細(xì)胞死亡，務(wù)必保證原始細(xì)胞無支原體污染。2.查閱壓力篩選條件在目標(biāo)細(xì)胞系中穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選的致死用量信息。3.查閱文獻(xiàn)確定慢病毒在目標(biāo)細(xì)胞系中的滴度。4.轉(zhuǎn)染后可以進(jìn)一步進(jìn)行單克隆穩(wěn)轉(zhuǎn)株培養(yǎng)，可采用稀釋法和培養(yǎng)...

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，深入探討和研究人類各種疾病的發(fā)病機(jī)制及康復(fù)機(jī)制，單純以人本身作為實(shí)驗(yàn)對象是困難的，而且時間和空間上也存在著局限性，而動物模型克服了這些缺點(diǎn)和不足，可以作為實(shí)驗(yàn)設(shè)計和臨床設(shè)計的試驗(yàn)基礎(chǔ)。動物疾病模型主要用于實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)學(xué)（包括新藥篩選）研究。有以下三種不同的分類方式。按產(chǎn)生原因分類：自發(fā)性動物模型，是指實(shí)驗(yàn)動物未經(jīng)任何有意識的人工處置，在自然情況下所發(fā)生的疾病。包括突變系的遺傳疾病和近交系的疾病模型。誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動物模型，實(shí)驗(yàn)性動物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動物，造成動物組織或全身一定的損害，出現(xiàn)某些類似人類疾病時...

細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一，是生物體的重要生命特征。細(xì)胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式，有有絲分裂，無絲分裂，減數(shù)分裂。上海東寰為您分享有絲分裂的周期變化。有絲分裂的周期變化細(xì)胞分裂期在細(xì)胞分裂期，很明顯變化是細(xì)胞核中染色體的變化。人們?yōu)榱搜芯糠奖悖逊至哑诜譃樗膫€時期：前期，中期，后期，末期。其實(shí)，分裂期的各個時期的變化是連續(xù)的，并沒有嚴(yán)格的時期界限。前期細(xì)胞分裂的前期，很明顯的變化是細(xì)胞核中出現(xiàn)染色體。分裂間期復(fù)制的染色體，由于螺旋纏繞在一起，逐漸縮短變粗，形態(tài)越來越清楚。在光學(xué)顯微鏡下觀察這個時期的細(xì)胞,可以看到每一條染...

細(xì)胞內(nèi)吞檢測細(xì)胞內(nèi)吞檢測服務(wù)（DH0013）一、服務(wù)介紹1)無菌條件下，將DiI-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至25-50μg/ml。2)加入活細(xì)胞內(nèi)，37℃培養(yǎng)4-5小時。3)孵育結(jié)束，吸去含有HumanDiI-LDL的培養(yǎng)基，并用無探針的培養(yǎng)基洗幾次。4)細(xì)胞固定5)熒光顯微鏡拍照二、服務(wù)內(nèi)容及價格服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價格服務(wù)周期（工作日）DH0013細(xì)胞內(nèi)吞檢測服務(wù)（DIL-Ac-LDL）咨詢咨詢?nèi)⒖蛻籼峁?.符合實(shí)驗(yàn)要求的細(xì)胞藥品（包括說明書）（可代為購買）,若無任何說明，默認(rèn)由本公司提供。四、提交給客戶結(jié)果1、完整實(shí)驗(yàn)報告一份，包括實(shí)驗(yàn)流程、數(shù)據(jù)和圖片等2、結(jié)果分析報告五、服務(wù)項(xiàng)...

使每條染色體的著絲點(diǎn)排列在細(xì)胞中間的一個平面上。這個平面與紡錘體的中軸相垂直，類似于地球上赤道的位置，所以叫做赤道板。分裂中期的細(xì)胞，染色體的形態(tài)比較固定，數(shù)目比較清晰，便于觀察清楚。后期細(xì)胞分裂的后期，每一個著絲點(diǎn)分裂成兩個，原來連接在同一個著絲點(diǎn)上的兩條姐妹染色單體也隨著分離開來，成為兩條子染色體。紡錘絲牽引著子染色體分別向細(xì)胞的兩極，使細(xì)胞的兩極各有一套染色體。這兩套染色體的形態(tài)和數(shù)目是完全相同的，每一套染色體與分裂以前的親代細(xì)胞中的染色體的形態(tài)和數(shù)目是相同的。末期當(dāng)這兩套染色體別到達(dá)細(xì)胞的兩極以后，每條染色體的形態(tài)發(fā)生變化，又逐漸變成細(xì)長而盤曲的絲。同時，紡錘絲逐漸消失，出現(xiàn)新...

具體選用何種培養(yǎng)器皿取決于細(xì)胞生長密度需求（啟動正常生長所需的密度）。二.細(xì)胞換液培養(yǎng)1、全量換液：把所有的舊培養(yǎng)液移除，加入新的培養(yǎng)液（加入培養(yǎng)基的量根據(jù)細(xì)胞的密度和生長速度）；2、半量換液：把舊培養(yǎng)液移至15ml離心管中，然后在培養(yǎng)器皿中加入適量新培養(yǎng)基（避免細(xì)胞離開培養(yǎng)液太久），把裝有舊培養(yǎng)液的離心管進(jìn)行離心（1000RPM,10min），離心后取適量舊培養(yǎng)上清至培養(yǎng)器皿中。注意事項(xiàng)1.全量換液適合于生長較快的腫瘤細(xì)胞，因?yàn)檫@些細(xì)胞可在短期內(nèi)分泌足夠的因子來支撐其生長；2.半量換液主要適合于生長較慢的原代細(xì)胞和干細(xì)胞，這些細(xì)胞很難在短期內(nèi)分泌足夠的因子來支撐其生長，舊培養(yǎng)液中恰好...

EdU細(xì)胞増殖檢測試劑盒(紅色熒光)使用說明產(chǎn)品簡介細(xì)胞增殖是評價細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物，其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見，能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中，通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣...

免疫沉淀（IP/ChIP）免疫沉淀（IP/ChIP）技術(shù)服務(wù)(DH1005)一.服務(wù)內(nèi)容1、蛋白提取及沉淀處理：從人或動物細(xì)胞、組織，細(xì)胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量：對樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析。3、WesternBlot檢測（1）電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品。（2）濕法轉(zhuǎn)印。（3）雜交：用抗體鑒定膜上的特定蛋白。（4）顯色：ECL熒光顯色，黑條帶白背景照片4、進(jìn)行蛋白內(nèi)參檢測（所有內(nèi)參抗體均不收取費(fèi)用）。5、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)。二.樣品要求1、細(xì)胞＞1×10^7；組織＞30mg；細(xì)菌濕重＞1mg等。2、樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣...

所以可以用于研究藥物對急性胰腺炎的影響。大鼠卵巢切除（OVX模型）大鼠卵巢切除術(shù)是對人類絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的模擬。為了構(gòu)建大鼠的動物中老年骨質(zhì)疏松模型，亦是使用很普遍且研究很多的實(shí)驗(yàn)用骨質(zhì)疏松癥動物模型。大鼠進(jìn)入動物房后飼養(yǎng)一周讓其適應(yīng)環(huán)境后再開始實(shí)驗(yàn)，麻醉，備皮，從大鼠側(cè)背部開口找到卵巢，結(jié)扎子宮，切除卵巢層層縫合即可。大鼠前交叉韌帶切除造骨關(guān)節(jié)炎模型（OA模型）骨關(guān)節(jié)炎是一種慢性，漸進(jìn)性，退行性關(guān)節(jié)病變，是臨床上很常見的關(guān)節(jié)疾病。而切除前交叉韌帶的方式可以為進(jìn)行骨關(guān)節(jié)炎防治提供理論依據(jù)。大鼠進(jìn)入動物房后飼養(yǎng)一周讓其適應(yīng)環(huán)境再開始實(shí)驗(yàn)。麻醉，備皮，沿著膝蓋側(cè)部開口，打開關(guān)節(jié)腔，剪斷前交叉...

為了減少擴(kuò)增突變的引入，推薦使用高保真PCRMix進(jìn)行擴(kuò)增，推薦使用預(yù)線性化的質(zhì)粒作為模板，以減少環(huán)狀質(zhì)粒模板殘留對克隆陽性率的影響。注意：以環(huán)狀質(zhì)粒為模板時，PCR產(chǎn)物需要使用DpnI等甲基化敏感型限制性內(nèi)切酶對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行處理，或?qū)Ξa(chǎn)物進(jìn)行膠回收純化。2.插入片段制備引物設(shè)計原則：通常使用PCR擴(kuò)增的方法來獲得目的片段，PCR引物的5'端必須包含與其相鄰片段（插入片段或載體）末端同源的15~25nt（推薦18nt）序列,以保證擴(kuò)增產(chǎn)物的5'端和3'端分別與相鄰片段形成重疊序列。目的片段PCR引物包括：載體與插入片段連接處引物、插入片段與片段連接處引物。插入片段正向擴(kuò)增引物：5'—上...

隨著社會的發(fā)展，身體健康成為民生重點(diǎn)關(guān)注熱點(diǎn)，從人體上看疾病遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能確定病情的癥狀及疾病的醫(yī)療。所以我們可以通過動物疾病模型，去實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)的理念。一些手術(shù)動物模型可以讓我們更好地去觀察以及防治某些疾病；例如：大鼠1/2切腎，可模擬臨床單邊腎功能缺失疾病模型大鼠1/2切腎，可模擬臨床單邊腎功能缺失疾病模型。大鼠在進(jìn)入動物房一周后，等其適應(yīng)環(huán)境再開始實(shí)驗(yàn)。麻醉，備皮，側(cè)背部開口，結(jié)扎腎蒂，剪除腎臟，若無出血即為手術(shù)成功；層層縫合等其蘇醒即可。1/2切除大鼠腎臟會在病程初期呈現(xiàn)出較強(qiáng)代償性作用，但代償性并不能滿足機(jī)體需要，后期腎臟依然會持續(xù)惡化，在防御與醫(yī)療過程中可采取相關(guān)措施，從而達(dá)到有效的...

基因克隆及載體構(gòu)建服務(wù)基因克隆及載體構(gòu)建服務(wù)（DH1001）一.服務(wù)內(nèi)容1、引物設(shè)計：客戶提供目的基因及相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）2、質(zhì)粒制備：由客戶提供或由我公司代為購買。3、克隆載體：由客戶提供或由我公司代為購買。4、基因亞克隆：1)DNA定向克隆到新的載體，準(zhǔn)確度高。2)可完成5kb以上DNA長片段的克隆.3)較個工作日即可完成二.樣品要求1、客戶需提供克隆基因信息及經(jīng)測序驗(yàn)證的質(zhì)粒模板>5ul（）2、客戶需提供克隆載體2ug/個。3、非常用的限制性內(nèi)切酶5ul/個注：若有特殊處理的樣品，請盡可能出示相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）。三.收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價格服務(wù)...

流水線作業(yè)，這樣能節(jié)省時間，并且能保證樣品的質(zhì)量。如果請人，每個人需要負(fù)責(zé)哪一板塊的工作，比如誰負(fù)責(zé)麻醉，誰負(fù)責(zé)取血液，誰負(fù)責(zé)取，誰負(fù)責(zé)拍照、誰負(fù)責(zé)儲存，都需要提前規(guī)劃交代清楚。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測如果是需要自己做的檢測，比如常見的WesternBlot、PCR，建議提前可以看看教程（無論是視頻還是貼吧，都要自己多方參考）。有了一定的理論基礎(chǔ)后，再向老師、師兄師姐學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)，如果實(shí)驗(yàn)平臺的儀器需要提前預(yù)約，建議提前規(guī)劃好使用的時間。反復(fù)總結(jié)尋找答案在整個預(yù)實(shí)驗(yàn)的過程中可能會出現(xiàn)很多問題。比如造模效果欠佳、灌胃操作不當(dāng)、腹腔注射操作失誤、物使用不當(dāng)?shù)纫饎游锼劳觥Ｃ坑龅絾栴}都需要自己想辦法解...

然后立即把細(xì)胞轉(zhuǎn)移至提前準(zhǔn)備的裝有5-10ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基的15ml離心管中；4、離心，小心移除上清；5、加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基，吹打重懸細(xì)胞，然后把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶中，并放入二氧化碳培養(yǎng)箱（5%CO2,37℃）中培養(yǎng)；6、第二天觀察細(xì)胞的貼壁情況，并進(jìn)行換液。注意事項(xiàng)細(xì)胞復(fù)蘇操作要求快速，否則細(xì)胞容易在凍融過程中產(chǎn)生冰晶，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡，所以必須提前準(zhǔn)備好所需的培養(yǎng)基、培養(yǎng)耗材和其他所需物品，不允許臨時準(zhǔn)備；2.在解凍細(xì)胞前，必須把超凈工作臺準(zhǔn)備至工作狀態(tài)，提前準(zhǔn)備裝有5-10ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基的15ml離心管；3.為了降低復(fù)溫對其它細(xì)胞的影響，可把該存儲架子放置...

原代細(xì)胞是指在機(jī)體或組織中直接從生物體分離出來的、未經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。這種細(xì)胞保持著其原始的生物學(xué)特性，具有高度的活性和分裂能力。原代細(xì)胞在許多生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位，包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發(fā)等。原代細(xì)胞的獲得通常是通過組織剪切、消化或酶解等方式從機(jī)體或組織中分離出來。這些細(xì)胞脫離了它們在生物體中的環(huán)境，但是仍然保持著其基本的生物學(xué)特性，包括細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞器以及其他重要的生物分子。原代細(xì)胞在未經(jīng)過傳代培養(yǎng)的情況下，保持著其原始的生物學(xué)特性，因此，它們常常被用于藥物篩選、毒理學(xué)研究等。同時，由于原代細(xì)胞具有高度活性和分裂能力，它們也被用于組織工程和再生醫(yī)學(xué)中，如...

原理過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系（OverexpressionStableCellLines）的構(gòu)建利用慢病毒轉(zhuǎn)染、電轉(zhuǎn)等技術(shù)手段將特定的基因序列整合到宿主細(xì)胞的染色體上，使得目的基因能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)長期且穩(wěn)定的表達(dá)。用途基因功能研究、免疫/殺傷/增殖等、抗體藥物的活性篩選（細(xì)胞水平的結(jié)合和阻斷）、CAR分子的殺傷活性評價。材料與儀器（以慢病毒pMSCV載體為例）包含目的基因和eGFP-Tag的pMSCV質(zhì)粒、帶有eGFP-Tag的pMSCV空載質(zhì)粒、GAG質(zhì)粒、VSV質(zhì)粒、Puromycin、Polybrene、Lipo3000、HEK293T細(xì)胞、opti-MEM、DMEM、FBS、雙抗、μm...

ELISA檢測技術(shù)服務(wù)ELISA檢測技術(shù)服務(wù)（DH1006）一、服務(wù)介紹ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗原分子共價結(jié)合，此種結(jié)合不會改變抗體的免疫學(xué)特性，也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因此，可通過底物的顏色反應(yīng)來判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過ELISA檢測儀進(jìn)行定量測定，這樣將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來，使ELISA方法成為一種既特異又敏感的檢測方...

用一次定量放血法可擺分之?dāng)[造成出血性休克，擺分之?dāng)[死亡，這就符合可重復(fù)性和達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)化要求。(三)可靠性復(fù)制的動物模型應(yīng)該力求可靠地反映人類疾病，即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種功能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，經(jīng)化驗(yàn)或X線照片、心電圖、病理切片等證實(shí)。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動物，就不應(yīng)加以選用，易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。(四)適用性和可控性供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究用的動物模型，在復(fù)制時，應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究的開展。(五)易行性和經(jīng)濟(jì)性在復(fù)制動物模型時，所采用的方法應(yīng)盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)條件原則。以上就是上...