上海Vero宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測常見問題分析

來源：發(fā)布時(shí)間：2025-11-03

在宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測的分析方法里，ELISA法應(yīng)用較多，也是QC日常放行檢測的主要方式。該方法操作相對簡便、檢測精度較好，便于設(shè)定控制范圍與制定技術(shù)規(guī)范，適用于產(chǎn)品開發(fā)及過程控制；不過，ELISA檢測依賴抗原與抗體的特異性結(jié)合，因此以生物制品中HCP為免疫原制備的抗體質(zhì)量，對檢測結(jié)果影響極大。無論是市售ELISA試劑盒，還是實(shí)驗(yàn)室自制的多克隆抗體，若抗體的特異性與適用性不足，都可能導(dǎo)致HCP漏檢，進(jìn)而給生物制品質(zhì)量安全埋下隱患。另外，ELISA檢測HCP時(shí)采用多克隆抗體，無法針對性反映高風(fēng)險(xiǎn)HCP殘留蛋白的實(shí)際存在狀況。

生物制品臨床申報(bào)需提交 HCP 抗體覆蓋率數(shù)據(jù)，否則可能面臨監(jiān)管發(fā)補(bǔ)要求。上海Vero宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測常見問題分析

上海Vero宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測常見問題分析,宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測

湖州申科生物參照 USP 通則 <1132.1> 的相關(guān)內(nèi)容，憑借公司在生物制品質(zhì)量控制領(lǐng)域十余年的深耕經(jīng)驗(yàn)，對 LC-MS 檢測 HCPs 的方法開展評價(jià)與優(yōu)化。同時(shí)通過為 LC-MS 檢測 HCPs 的整體流程構(gòu)建完整質(zhì)控體系，建立起一套抗干擾能力強(qiáng)、穩(wěn)定性佳、準(zhǔn)確度高且結(jié)果真實(shí)可靠的 LC-MS 檢測 HCPs 標(biāo)準(zhǔn)方法。該檢測技術(shù)平臺包含樣品制備、質(zhì)譜檢測、數(shù)據(jù)生信分析及質(zhì)譜結(jié)果方法驗(yàn)證四個(gè)部分，目前利用該 LC-MS 平臺已完成對 293T、不同工藝大腸桿菌（E.coli）、CHO、Vero、MDCK、Sf9 等不同工程細(xì)胞 HCPs 抗體覆蓋率的檢測分析。

廣東生物制品宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測常見問題分析宿主檢測方法替換需橋接驗(yàn)證，確保新舊方法結(jié)果一致性與可比性。

大腸桿菌具有遺傳背景明確、便于培養(yǎng)與調(diào)控、蛋白表達(dá)量高、成本低廉且培養(yǎng)周期短等特點(diǎn)，是性價(jià)比高的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。其中，K-12系列與B系列菌株是工業(yè)級生物工程中常用的大腸桿菌菌株。K-12菌株及其衍生的DH5α、Top10、JM109等菌株，可用于大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)粒DNA，進(jìn)而制備細(xì)胞基因治療產(chǎn)品與病毒載體類疫苗；而源自B系列的菌株（如BL21），更適合高效轉(zhuǎn)染表達(dá)載體及常規(guī)蛋白的表達(dá)，例如病毒蛋白、重組蛋白疫苗、細(xì)胞因子、酶類等產(chǎn)品。湖州申科生物依據(jù)這兩種菌株的特性，分別研發(fā)了大腸桿菌表達(dá)菌HCP殘留檢測試劑盒與大腸桿菌克隆菌堿裂HCP殘留檢測試劑盒。

MDCK（Madin-DarbyCanineKidney，馬丁達(dá)比犬腎上皮細(xì)胞）細(xì)胞系是源于犬腎的持續(xù)性細(xì)胞系，廣泛應(yīng)用于流感病毒增殖純化、流感疫苗生產(chǎn)等過程，作為細(xì)胞基質(zhì)使用。憑借高病毒產(chǎn)量與滴度、無適應(yīng)性突變、易馴化等優(yōu)勢，MDCK細(xì)胞已成為業(yè)界公認(rèn)的流感病毒毒株分離及流感疫苗生產(chǎn)適配細(xì)胞系。和其他產(chǎn)品雜質(zhì)類似，MDCK宿主殘留蛋白（HCP）可能對生物制品的安全性與有效性產(chǎn)生不良影響，因此在生產(chǎn)監(jiān)測、產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)，需對其開展定量研究并實(shí)施嚴(yán)格控制。SHENTEK^®MDCK HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），是湖州申科生物自主研發(fā)、擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)且關(guān)鍵試劑實(shí)現(xiàn)全國產(chǎn)化的MDCK HCP通用檢測試劑盒。該試劑盒適用于基于MDCK細(xì)胞基質(zhì)的病毒增殖純化、疫苗生產(chǎn)等過程，可對其中的MDCK宿主殘留蛋白進(jìn)行定量檢測，且操作步驟簡便快捷、檢測專一性高、性能穩(wěn)定可靠。

湖州申科建立宿主特異 HCP 數(shù)據(jù)庫，支持高風(fēng)險(xiǎn)蛋白準(zhǔn)確鑒定與分析。

湖州申科生物推出的宿主細(xì)胞殘留蛋白檢測全自動(dòng) ELISA 分析系統(tǒng)，集成了標(biāo)曲制備、樣本加樣、恒溫孵育、板孔清洗及結(jié)果檢測等全流程操作功能。系統(tǒng)配備的高精度前處理模塊與檢測模塊，能通過準(zhǔn)確控制實(shí)驗(yàn)參數(shù)，切實(shí)降低人為操作誤差，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與準(zhǔn)確性。該系統(tǒng)采用多模塊單獨(dú)運(yùn)行設(shè)計(jì)，可實(shí)現(xiàn)不同檢測任務(wù)的并行處理，大幅縮短實(shí)驗(yàn)周期，提升整體實(shí)驗(yàn)效率。在保障結(jié)果可靠性的前提下，系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了 ELISA 實(shí)驗(yàn)的自動(dòng)化操作、流程標(biāo)準(zhǔn)化與結(jié)果快速輸出，降低了對實(shí)驗(yàn)人員的技能要求，同時(shí)通過優(yōu)化資源配置降低檢測成本。此外，系統(tǒng)內(nèi)置完善的數(shù)據(jù)管理功能，可滿足實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)完整記錄與全流程審計(jì)追蹤的需求，嚴(yán)格契合 21 CFR Part 11 法規(guī)要求，且配備三級權(quán)限管理機(jī)制，進(jìn)一步保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的安全性與規(guī)范性。

HCP檢測的經(jīng)典方法是ELISA法，但該方法在檢測過程中存在漏檢風(fēng)險(xiǎn)，需要對試劑盒抗體進(jìn)行抗體覆蓋率評估。北京定制化宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗(yàn)證

HCP 定制化開發(fā)需構(gòu)建成熟平臺、技術(shù)實(shí)力、合規(guī)體系、穩(wěn)定供應(yīng)、專業(yè)團(tuán)隊(duì)及成功案例的全維度支撐體系。上海Vero宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測常見問題分析

美國藥典 USP 通則 <1132.1>《質(zhì)譜法測定生物藥中殘留宿主細(xì)胞蛋白》（Residual Host Cell Protein Measurement in Biopharmaceuticals by Mass Spectrometry），主要內(nèi)容是介紹 LC-MS 技術(shù)在宿主細(xì)胞殘留蛋白檢測中的應(yīng)用。該通則圍繞樣品制備、質(zhì)譜測試條件建立、數(shù)據(jù)分析、質(zhì)譜方法驗(yàn)證等維度，詳細(xì)說明質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用于 HCPs 檢測的優(yōu)勢及需注意的事項(xiàng)。作為先進(jìn)的分析技術(shù)平臺，質(zhì)譜技術(shù)在 HCPs 分析中的應(yīng)用，無論是單獨(dú)使用，還是與 ELISA 及其他分析方法聯(lián)合使用，都能幫助生產(chǎn)企業(yè)在產(chǎn)品全生命周期中更清晰地理解并建立 HCPs 檢測方法，進(jìn)而保障產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。

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標(biāo)簽：宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測內(nèi)毒素檢測宿主細(xì)胞殘留DNA檢測熱原檢測

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