江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU與T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無(wú)需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性~上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)如今市場(chǎng)的影響。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記（如P65抗體）等進(jìn)行多重標(biāo)記，從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息，更適合深入開(kāi)展細(xì)胞功能方面的研究。該方法無(wú)需DNA變性，無(wú)需抗原修復(fù)，無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確，適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè)，尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn)，如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒可以去哪里購(gòu)買(mǎi)？

EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào)：“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同，EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成，且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理，使得組織成像更簡(jiǎn)單易行。”細(xì)胞增殖檢測(cè)方法基于EdU與Apollo？熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測(cè)新合成的DNA，簡(jiǎn)單，快速，準(zhǔn)確。這種檢測(cè)方法非常快速，且只需簡(jiǎn)單的幾個(gè)步驟，因此也適用于高通量篩選試驗(yàn)，如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞的活力

羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑，經(jīng)過(guò)10mM羥基脲提0min處理的細(xì)胞，綠色熒光陽(yáng)性的細(xì)胞幾乎完全消失，因此常被用作EdU實(shí)驗(yàn)的陰性對(duì)照。配制好的Click-iTAdditiveSolution請(qǐng)根據(jù)每次用量適當(dāng)分裝后-20℃保存，避免反復(fù)凍融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物質(zhì)析出為正常現(xiàn)象，請(qǐng)上下顛倒幾次，待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色，則說(shuō)明有效成分降解，不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細(xì)胞的細(xì)胞懸液，以及其他含多種細(xì)胞類(lèi)型的混合細(xì)胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細(xì)胞的同時(shí)，維持白細(xì)胞的光散射特性。本試劑盒做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)可能需要更多的EdU，請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用合適稀釋液稀釋后使用。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的價(jià)格。

EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過(guò)一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱(chēng)作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見(jiàn)圖1。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處有哪些？上海提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)